MOLECULAR BIOLOGY

Quantificazione del DNA allo spettrofotometro

Source: Fondazione Diasorin

Level of schooling: high

Classrooms: 3, 4, 5

Date: 10-07-2023

Description

Spesso nei laboratori scolastici il DNA viene estratto e purificato da diverse fonti biologiche. Ma quanto DNA è effettivamente presente in provetta? Quale è la sua concentrazione? Per rispondere in modo attendibile a queste domande, bisogna eseguire una quantificazione con lo spettrofotometro, uno strumento in grado di emettere un raggio luminoso monocromatico, che attraversa il campione di DNA. A seconda di quante particelle sono presenti nel campione in esame, il raggio luminoso di partenza sarà assorbito e avrà in uscita una intensità più o meno inferiore. Applicando poi la legge di Lambert-Beer è possibile convertire il valore di assorbimento (Assorbanza, Abs) in concentrazione di DNA e rispondere al quesito iniziale. Solo con questo dato ci si mette nelle condizioni ottimali per una buona riuscita di attività più complesse, come l’amplificazione tramite PCR, che prevedono l’uso del DNA.

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Scarica il protocollo per eseguire la quantificazione del DNA allo spettrofotometro e conoscere la concentrazione del DNA del campione in esame.